伯森生技電子報 20197月號第1 無法看到畫面顯示?請點選這裡開啟網頁

期待已久的 PCSK9 和 LDLR
結合檢測試劑套組來啦

PCSK9 (Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9) 又稱為 FH3、HCHOLA3、NARC1 和 PC9,是調節血漿中膽固醇含量的關鍵因子。

PCSK9 與低密度脂蛋白受體 LDLR (Low density lipoprotein receptor) 的結合,會促使 LDLR 直接被肝細胞內的溶解脢分解掉,從而降低血管中低密度脂蛋白 LDL (Low-density lipoprotein) 的清除率。因此阻斷 PCSK9 和 LDLR 的結合,將有助於降低血漿中膽固醇含量,被視為是治療心血管疾病的潛力藥物標靶之一。

由專精新藥開發技術的 PerkinElmer 公司所推出的【PCSK9 和 LDLR 結合檢測試劑套組】,採用專利 AlphaLISA? 技術,具有流程簡便快速、反應精確靈敏等高效特性。作用原理是藉由表面帶有 6xHis 抗體的 AlphaLISA? 受體微珠 (Acceptor bead) 捕獲帶有 6xHis 標記的 PCSK9、以及使用 Streptavidin 包被的供體微珠 (Donor bead) 捕獲帶有 Biotin 標記的 LDLR。當供體微珠與受體微珠透過 LDLR 與 PCSK9 的結合拉近距離時,在 680 nm 雷射光激發下,供體微珠表面帶有的光敏感物質即會催化周遭的氧分子形成活化態的單態氧,並進一步將能量傳遞給受體微珠,促發其產生 615 nm 的光訊號。

AlphaLISA Assay Principle

AlphaLISA Assay Principle
IMAGE ? PCSK9/LDLR (human) AlphaLISA Binding Kit Product Page.

多說無益,讓我們直接來看幾個典型的競爭實驗檢測結果。

PCSK9/LDLR Binding Kit 檢測效能

Antibody competitive binding to PCSK9:LDLR-biotin (10nM:10nM). Anti-PCSK9 antibody blocking PCSK9/LDLR binding with IC50 = 0.71 nM. Human IgG1 was measured as a negative control. IMAGE ? PCSK9 and LDLR (Human) Binding AlphaLISA Kit Technical Data Sheet, Figure 2A.

Antibody competitive binding to PCSK9:LDLR-biotin (10nM:10nM). Anti-LDLR antibody blocking PCSK9/LDLR binding with IC50 = 3.5 nM. Goat IgG was measured as a negative control. IMAGE ? PCSK9 and LDLR (Human) Binding AlphaLISA Kit Technical Data Sheet, Figure 2B.

Unlabeled protein competitive binding to PCSK9:LDLR-biotin (10nM:10nM). Non-his-tagged PCSK9 and nonbiotinylated LDLR competitive binding to PCSK9/LDLR binding. The IC50 were 448 nM and 45.8 nM respectively. IMAGE ? PCSK9 and LDLR (Human) Binding AlphaLISA Kit Technical Data Sheet, Figure 2C.

前往 PerkinElmer 官方網站PerkinElmer 能夠提供蛋白質交互作用實驗全套解決方案,包含檢測試劑、微量多孔盤、以及偵測設備等。更多 Alpha 技術應用說明可參閱《Alpha 生物分子檢測平臺中文產品目錄》,或歡迎洽詢 PerkinElmer 臺灣代理 — 伯森生技。

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